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山东细胞实验:细胞培养实验基本操作要求

来源:山东细胞实验发布时间:2014-12-26 09:54:24

每天应该对细胞实验室进行半小时的紫外照射灭菌。紫外辐射对人体有害,灭菌时,人员不能进入细胞实验室。
山东细胞实验:细胞培养实验基本操作要求
进入细胞实验室操作的人员,应该身着消毒过的白大褂,更换消毒过的拖鞋,操作有毒试剂要带好手套。外来带入的物品,都要经过紫外照射或者酒精擦拭的表面灭菌。
裸手进行细胞操作,则要在操作之前用消毒液洗手,并在将手伸进超净台前用酒精擦拭全部手部皮肤。带橡胶手套进行细胞操作,在将手伸进超净台前也要用酒精擦拭手套的整个外表面。
试剂要按储存要求保存,在超净台内打开过一次的试剂,储存前要用封口膜封住瓶口,并最好在封口膜上表明打开日期。
使用超净台之前,应该将超净台的机玻璃板合上,打开超净台紫外开关进行半小时的紫外杀菌。超净台紫外灭菌完毕后,应关闭紫外开关,打开超净台通风开关,然后才能打开有机玻璃板。一般在使用超净台时,有机玻璃不能离台面太远,保持在20cm以内。
超净台灭菌以后,任何拿进超净台的物品都要用酒精擦拭物体的全部表面,然后在酒精未干之前放进超净台。要使用到的细胞培养耗材可以在超净台灭菌前放入其中,跟超净台一起灭菌。而细胞培养要使用到的试剂则不可以放入超净台接受紫外照射。
细胞实验要使用到的直接接触细胞的试剂,一般要在37度水浴锅中预热半小时,使其温度接近37度。
细胞离开培养箱被进行操作的过程不宜过长,否则由于外界温度和二氧化碳浓度的不适,会导致细胞状态不好甚至死亡。
细胞培养用的器皿,包括培养瓶、培养皿等等,要对着酒精灯的火焰打开开口,操作过程开口都要对着酒精灯火焰10cm范围内。细胞培养使用的试剂,在酒精擦拭试剂储存器皿后带入超净台。打开瓶盖之前要再用酒精棉花擦拭瓶口,然后对准酒精灯火焰打开开口。操作过程整个开口都要对着酒精灯火焰10cm范围内。
操作过程最重要的原则是保持细胞和试剂无菌,并且避免细胞和试剂之间、试剂和试剂之间的交叉污染。比如已经将移液管伸入细胞瓶里吹打细胞,那么要再吸取新的培养液加到培养瓶中则不能再使用该移液管,一定要更换新移液管再去吸取新的培养液。尽量减少细胞和培养液暴露的时间。