细胞培养

首先，抗生素的发展使得我们可以轻易避免许多曾经困扰细胞培养的污染问题。第二是技术的发展，如利用胰酶将细胞从培养瓶上消化下来，从而获得持续生长的细胞株(如HeLa细胞)。第三，利用这些细胞株，科学家们能够研制标准化、化学成分确定的细胞培养基进而更利于细胞的生长。这三个方面的联合发展，使得越来越多的科学家在他们的研究中采用了细胞、组织和器官培养的方法。

在上个世纪60年代和70年代，这一技术的商业化应用更进一步影响细胞的培养且一直持续到今天。如康宁公司开始研发和销售一次性塑料和玻璃细胞培养产品、改进的过滤产品和材料、液体和粉末状组织培养基以及高通量药物筛选的系列相关产品。这些和其他技术的持续发展使得细胞培养在大量实验室和工业企业中的应用更为普遍。

在150mm培养皿表面对人包皮外植体进行固定染色。培养外植体大约两个星期。9个外植体中2个无法生长。剩下的外植体生长良好。每个方框约宽2cm。

原代培养

当采用外科操作的方法将细胞从有机体中分离下来，然后置于合适的培养环境中，它们会附着、分裂和生长。这称为原代培养。原代培养有两种基本的方法。第一种，使用外植块，将小片的组织粘附到玻璃或经处理的塑料培养瓶中，并浸于培养液中。几天之后，单个细胞将从组织外植块中移动到培养瓶的表面或基质中开始分裂生长。第二种方法，也是使用更广泛的方法，通过在组织碎片中加入消化（蛋白水解）酶，如胰酶或胶原酶，消化成团聚集的细胞从而加快这一步骤。最终得到单细胞的悬液，然后将其置于含有培养液的细胞培养瓶内，让其继续生长分裂。这种方法成为酶解。

对亮星花鱼细胞进行原代培养。胚胎切碎后用胰酶进行解离。然后将细胞培养一周左右，形成融合的单层细胞。

传代接种

当原代培养瓶中的细胞已经生长且布满了所有可用的培养基质后，它们必须进行传代以便为继续生长提供空间。这通常需要将细胞尽可能轻柔地从基质上用胰酶消化下来。这些酶类似于原代培养中使用的酶，它能够打断使细胞粘附到基质上的蛋白键。有些细胞株可以通过轻轻刮除培养瓶底部的细胞加以收集。收集之后，将细胞悬液进行进一步的分散并置于新的培养瓶中。

当细胞过多时，则可以用合适的低温保护的试剂，如二甲基亚砜或甘油进行小心冰冻，然后置于低温环境（－130℃以下）中，直到需要再次使用。低温保存细胞的理论和技术已经包括在康宁技术通报：关于动物细胞培养低温保存的初级指南（参考文献9）。