​基因敲除技术是20世纪80年代发展起来的，是建立在基因同源重组技术基础以及胚胎干细胞技术基础上的一种新分子生物学技术。基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点，以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。本文对三种基因敲除技术作比较，描述它们的优缺点。

基于胚胎干细胞的同源重组技术

1、优势：成熟、可靠、精细是目前为止唯一一个可以满足所有要求的打靶技术

2、局限性：

A 需要ES细胞，目前只有小鼠有高效的ES细胞，其它模式动物的ESC还不能实现大规模应用。

B 周期长、工作量大、费用相对比较高

3、可提供服务类型：

A 全基因敲除模式小鼠

B 条件性基因敲除模式小鼠

C 先全敲除再条件性敲除模式小鼠

D 基因敲入模式小鼠

E ROSA位点定点转基因
 

TALEN技术

1、优势：基因敲除效率高，速度快，可实现多物种基因敲除

2、局限性：

基因敲入效率较低，多基因敲除困难，系统构建相对复杂，存在脱靶风险

3、可提供服务类型：

A 全基因敲除大/小鼠

B 全基因敲除细胞系
 

EGE系统

1、优势：基因敲除/敲入效率高，速度快，可实现多基因、多物种基因敲除/敲入，系统构建简单

2、局限性：

存在脱靶风险，但通过选择合适的sgRNA可以有效降低脱靶率，In vivo脱靶可通过传代去除.

3、可提供服务类型：

A 全基因/条件性基因敲除大/小鼠

B 全基因/条件性报告基因敲除/敲入大/小鼠

C CRISPR/Cas9粒构建

D 细胞系敲除/敲入